关键词:
纳米技术
基因
RNA,小分子干扰
癌,肝细胞
摘要:
目的探讨以透明质酸-聚乙烯亚胺/透明质酸-聚乙二醇(HA-PEI/HA-PEG)作为基因载体传递NAF1-siRNA对人肝细胞LM3进行增殖能力抑制的效果。方法将纳米复合物HA-PEI/HA-PEG与NAF1-siRNA复合,转染LM3细胞建立HNS组,等量NAF1-siRNA转染建立NSI组,另设未转染对照对照组,等量HA-PEI/HA-PEG干预细胞建立HAH组。采用荧光实时定量PCR检测细胞NAF1 mRNA的表达水平,采用Western blotting法检测NAF1、cyclin D1蛋白表达。采用MTT实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖抑制效果。4组比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验。结果以对照组NAF1 mRNA的相对表达量为100﹪进行检测。HNS组NAF1 mRNA的相对表达量为(2.12±0.17)﹪,与对照组相比,差异具有统计学意义(t=14.17,P=0.04)。HNS组LM3细胞的NAF1蛋白和Cyclin D1蛋白的相对表达量分别为0.07±0.01、0.06±0.00,而对应蛋白在对照组LM3细胞中的相对表达量分别为0.37±0.08、0.16±0.03,差异具有统计学意义(t=37.72,20.96,P=0.01,0.03)。HNS组细胞测得的细胞增殖抑制率为(73.20±0.43)﹪,与对照组的(0.49±0.02)﹪相比差异具有统计学意义(t=11.92,P=0.01)。HNS组LM3细胞的平板克隆形成率(8.35±0.33)﹪明显低于对照组的(23.61±0.10)﹪(t=17.75,P=0.00,0.02)。结论纳米复合物HA-PEI/HA-PEG可高效递送NAF1-si RNA,对肝癌LM3细胞进行转染,抑制NAF1表达,进而通过降低Cyclin D1表达水平抑制肝癌细胞LM3的增殖。