关键词:
卵巢储备功能减退
育肾养卵方
人工智能
网络药理学
HIF-1α/VEGFA信号通路
摘要:
目的 观察育肾养卵方对卵巢储备功能减退(diminished ovarian reserve,DOR)小鼠卵巢储备功能的影响,并基于低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α/血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)信号通路探讨其作用机制.方法 基于人工智能的网络药理学进行机制分析,将50只6周龄C57BL/6雌鼠按体质量随机区组法分为对照组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,每组10只.通过苏木精-伊红染色法观察卵巢窦卵泡计数,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清激素水平,缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测卵巢颗粒细胞凋亡;免疫组织化学法检测卵巢HIF-1α的表达;蛋白印迹法检测卵巢HIF-1α、VEGFA、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL2)的表达.结果 采用育肾养卵方低、中、高剂量治疗DOR模型小鼠后,中药低、中、高剂量组小鼠卵巢窦卵泡计数均高于模型组(P=0.024、P<0.001、P<0.001),卵泡刺激素水平均低于模型组(P=0.003、P<0.001、P<0.001),中药中、高剂量组血清抗苗勒管激素水平均高于模型组(P=0.001、P<0.001).网络药理学与分子结合提示育肾养卵方可能通过核心靶点HIF-1α、BCL2、VEGFA影响HIF信号通路.TUNEL提示中药低、中、高剂量治疗后小鼠卵巢颗粒细胞凋亡率均显著低于模型组(P=0.017、P=0.003、P<0.001),免疫组织化学结果显示中药低、中、高剂量治疗后小鼠卵巢颗粒细胞HIF-1α表达较模型组升高(P=0.008、P<0.001、P<0.001),蛋白印迹法显示中药中、高剂量组HIF-1α的蛋白表达量均显著高于模型组(P=0.004、P<0.001),低、中、高剂量组的VEGFA、BCL2 的蛋白表达量均显著高于模型组(P=0.003、P=0.002、P=0.001;P=0.029、P=0.007、P=0.001).结论 育肾养卵方可能是通过HIF-1α/VEGFA信号通路抑制卵巢颗粒细胞凋亡达到治疗效果.