关键词:
核因子E2相关因子(Nrf)2
胰岛素样生长因子(IGF)-1/血管内皮细胞生长因子(VEGF)
脑梗死
神经细胞凋亡
应激反应
摘要:
目的研究核因子E2相关因子(Nrf)2调节胰岛素样生长因子(IGF)-1/血管内皮细胞生长因子(VEGF)对脑梗死大鼠神经细胞活性及应激反应的影响。方法64只SPF级SD大鼠随机选取12只作为健康组,剩余大鼠建立脑梗死模型,建模过程中意外死亡4只,剩余模型随机分为模型组、Nrf2组、IGF-1组及联合组,每组12只。Nrf2组于腹腔注射Nrf2激动剂莱菔硫烷10 mg/kg,连续给药3 d;IGF-1组麻醉后于前囟后0.8 mm,中线旁1.8 mm,硬膜下3.7 mm将0.2μg/μl IGF-1注入大鼠侧脑室,持续10 min后缝合、消毒;联合组在Nrf2组基础上给予IGF-1组处理。Bederon评分评估大鼠是否建模成功,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织形态,分光光度计测量超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(iNOS)水平,TUNEL检测各组神经细胞凋亡,Western印迹检测各组Nrf2、IGF-1、VEGF蛋白表达。结果与健康组相比,模型组、Nrf2组、IGF-1组、联合组神经行为学评分、细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组相比,Nrf2组、IGF-1组、联合组神经行为学评分及细胞凋亡率明显降低(P<0.05),Nrf2组与IGF-1组以上指标差异无统计学意义(P>0.05);与Nrf2组、IGF-1组相比,联合组神经行为学评分及细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。健康组脑组织神经细胞结构完整;模型组神经细胞核深染且分布杂乱并伴有坏死产生;与模型组相比,Nrf2组、IGF-1组与联合组神经细胞核深染情况有所改善,分布较为整齐且坏死减少。与健康组相比,模型组SOD明显降低,MDA、LDH、iNOS明显升高(P<0.05);与模型组相比,Nrf2组、IGF-1组SOD明显升高,MDA、LDH、iNOS明显降低(P<0.05);Nrf2组与IGF-1组差异无统计学意义(P>0.05);与Nrf2组、IGF-1组相比,联合组SOD明显升高,MDA、LDH、iNOS明显降低(P<0.05)。健康组Nrf2、IGF-1、VEGF蛋白表达明显高于模型组、Nrf2组、IGF-1组、联合组、IGF-1抑制剂组、Nrf2+IGF-1抑制剂组(P<0.05);模型组与Nrf2+IGF-1抑制剂组差异无统计学意义(P>0.05),模型组与Nrf2+IGF-1抑制剂组Nrf2、IGF-1、VEGF表达明显高于IGF-1抑制剂组,明显低于Nrf2组、IGF-1组、联合组(P<0.05);Nrf2组与IGF-1组差异无统计学意义(P>0.05),Nrf2组与IGF-1组Nrf2、IGF-1、VEGF表达明显低于联合组(P<0.05)。Nrf2与IGF-1、VEGF呈正相关(r=0.26、0.27,均P<0.05),VEGF与IGF-1呈正相关(r=0.45,P<0.05)。结论Nrf2通过调节IGF-1/VEGF可抑制脑梗死大鼠神经细胞凋亡并减轻氧化应激损伤,从而发挥脑保护作用。