关键词:
脑梗死
隐丹参酮
铁死亡
氧糖剥夺
摘要:
目的 探讨隐丹参酮(CTS)调节神经细胞PC12铁死亡对小鼠脑梗死损伤的影响。方法 2022年12月至2023年10月,将PC12细胞分为细胞对照组、氧-糖剥夺(OGD)模型组、CTS(1,5,10μmol/L)组。将110只C57BL/6小鼠分为假手术组、大脑中动脉栓塞(MCAO)模型组、CTS(5,10,20 mg/kg)组,每组22只。使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测PC12细胞存活率,BeyoClickTM5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)-555细胞增殖试剂盒检测PC12细胞增殖,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测PC12细胞LDH释放率。采用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测PC12细胞和MCAO小鼠脑组织中活性氧(ROS)水平。酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒测定PC12细胞和小鼠脑组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和Fe2+水平。蛋白质印迹法测定PC12细胞和小鼠脑组织中溶质载体家族7成员11(SCL7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和转铁蛋白受体1(TFR1)蛋白表达水平。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法评价脑梗死体积。结果 与细胞对照组相比,OGD模型组PC12细胞存活率(17.47±5.50)%降低,LDH释放率(74.07±5.95)%增加(均P<0.05)。与OGD模型组相比,CTS(1,5,10μmol/L)组细胞存活率[(31.95±2.89)%,(46.24±5.78)%,(58.39±8.32%)]显著提高,LDH释放率[(62.73±3.23)%,(53.6±3.63)%,(36.23±4.46)%)]降低(均P<0.05)。OGD模型组ROS水平(DCFH-DA荧光强度)增至(8.74±1.37)OD,MDA水平升至(0.41±0.06)μmol/L,Fe2+水平达(5.6±0.98)μmol/L;CTS 10μmol/L组显著逆转上述指标[ROS(2.79±0.76)OD;MDA(0.18±0.03)μmol/L;Fe2+(2.5±0.36)μmol/L)]。MCAO模型组脑梗死体积百分比为(56.67±9.33)%,CTS 20 mg/kg组降至(12.13±2.42)%(P<0.05)。此外,CTS(10μmol/L)显著上调GPX4(0.95±0.15 vs. 0.17±0.05)和SCL7A11(1.23±0.09 vs. 0.21±0.02)蛋白表达,并降低TFR1(0.39±0.05 vs. 1.86±0.13)及炎症因子[TNF-α(23.99±2.19)pg/L vs.(51.32±2.91)pg/L;IL-6(21.56±2.46)pg/L vs.(41.3±2.62)pg/L]。结论 CTS对脑梗死小鼠脑组织损伤具有保护作用,作用机制可能与其抑制神经细胞铁死亡有关。